鄧瑞春¹，周勇²，張文生¹，徐建國³，尚靖³，王旭丹²，于魯海³
1 、北京師范大學資源學院資源藥物與中藥資源研究所，北京 100875；
 2 、北京中醫藥大學 中西醫結合研究所，北京 100875；
 3 、新疆自治區人民醫院 · 臨床藥學研究所，鳥魯木齊 830001

人類白癜風是一種頑固性皮膚病，病因尚不清楚，發病機制至少涉及4種學說，即自身免疫、 神經體液因素、自身細胞毒和接觸外源性物質等。近年來普遍認為自身免疫學說是白癜風的主要發生機制。驅蟲斑鳩菊( V e r n o n i a a n t h e l mi n t i c a  w i l l d，V W)注射液自新疆特有菊科植物驅蟲斑鳩菊的種子中提取，主要成分黃酮含量為 3 g/L。多年臨床應用顯示，該藥對白癜風具有明顯的治療效果。考慮到該藥治療白癜風可能與機體免疫系統有關，我們著重研究了該藥對正常小鼠免疫系統、酪氨酸酶的合成及其 mR N A表達的影響，以作用機制，為在臨床上廣泛應用提供實驗依據。

    本文進行一系列實驗探討VW對小鼠免疫功能的影響：淋 巴細胞轉化試驗測定小鼠脾T、B細胞增殖活性；脾細胞介導羊紅細胞定量溶血分光光度法測定B細胞生成抗體活性，流式細胞法測定B細胞上 CD19表達活性；遲發型超敏反應(DTH)試驗測定T細胞活性、【³H】- Td R摻入法測定T細胞分泌 IL-2活性等。然后用酶學方法研究VW對小鼠體內酪氨酸酶的作用。用半定量逆轉錄聚合酶鏈反應技術檢測酪氨酸酶基因表達活性。結果表明，VW可以明顯抑制小鼠體內T、B細胞的增殖反應( P<0.01) ；對綿羊紅細胞 (SRBC) 誘導的正常小鼠脾臟抗體形成細胞活性、 CD19 B細胞亞類表達、小鼠DTH反應和T細胞分泌IL-2活性也具 有明顯的抑制作用，這些抑制作用與藥物濃度有一定的劑量效應關系。VW 還可以提高小鼠血清酪氨酸酶活性，增強酪氨酸酶基因的表達。以上結果說明，VW可抑制小鼠免疫功能，可以從轉錄水平增強酪氨酸酶活性，進而促進黑素合成。

國外已將Smyth line (SL) 雞作為研究白癜風的動物模型，也是很好的人類自身免疫性白癜風的動物模型，但目前該動物模型尚未引入我國。因此我們采用了正常動物BAI.B/c小鼠作為研究對象，初步探討VW對免疫功能以及黑素合成的影響。

    近年研究發現，白癜風患者的免疫功能常出現異常，與正常人相比較，白癜風患者血清器官特異性抗體（包括抗黑素細胞的抗體）的陽性率明顯增高，外周血T細胞及其亞群也有異常改變，提示白癜風可能是一種自身免疫疾病。

    我們曾發現，VW在0.025-25g/L范圍內可明顯抑制正常小鼠脾T、B細胞的增殖反應，是脾臟指數與胸腺指數下降，并可抑制正常小鼠血清IgG，IgM，IgN，以及小鼠抗人A375黑素癌細胞抗體（總IgG含量及特異性IgG）。可見，VW可在器官與分子等不同水平對免疫功能產生影響。

    本實驗中，我們進一步觀察了VW對小鼠免疫功能的影響。VW3種劑量組（編者注：低劑量組 87.5mg/kg，為臨床用量的5倍；中劑量組175mg/kg,為臨床用量的10倍；高劑量組350mg/kg,為臨床用量的20倍；正常對照組注射等劑量生理鹽水。）均可明顯抑制正常小鼠脾臟T、B細胞的增殖，使B細胞上CD19表達量降低；DTH受到抑制，小鼠脾T細胞分泌IL-2的活性下降。

    黑素為吲哚和醌與蛋白質結合的高分子聚合物。黑素的合成必須具備以下3種基本物質：酪氨酸（制造黑素的主要原料，是蛋白質代謝的產物）、酪氨酸酶（酪氨酸轉變為黑素的催化劑，為銅及蛋白質的復合物，在黑素細胞的粗面內質網中合成）、 氧 (酪氨酸必須與氧結合才能在酪氨酸酶的作用下轉變為黑素) 。其中，酪氨酸酶在黑素合成過程中起關鍵性的限速酶作用。徐建國等報道，V W在體外可激活酪氨酸酶的活性。本研究也證明V W 3個劑量組均可明顯促進小鼠血清酪氨酸酶活性，并且證明這種作用可在轉錄水平發生，從而加速黑素的合成。 

    以上結果提示，V W對白癜風的治療作用，可能通過2方面發揮作用：一是抑制機體的免疫功能，降低機體對自身組織(如黑素細胞) 的免疫應答，從而減少自身黑素細胞的破壞；二是可促進酪氨酸酶的合成和降低其分解，促進酪氨酸的氧化，進而促進黑素的合成。 

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