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周倩珺，葉艷娜，李嬋，黎普茜，李栩萍，蔣敏橋

(廣東省東莞市人民醫院，廣東東莞523018)

(安徽醫藥2012年9月：1308-1309)

【摘要】目的 檢測FGF2蛋白在子宮內膜異位癥(EMs)患者及非內異癥患者腹腔沖洗液中的表達，探討其在EMs發生、發展中的作用。方法 采用酶聯免疫吸附試驗(ELISA)檢測45例子宮內異癥患者(EMs組)及4o例非內異癥患者(對照組)腹腔沖洗液中FGF2水平。結果 (1)在EMs組中，FGF2水平分別為(126.67±39.26)ng·L^-1，均高于對照組的(50.31±27.33)ng·L^-1，差異具有顯著性(P＜0.01)；(2)在EMs組中，III~IV期患者的FGF2水平為(118.75±45.81)ng·L^-1，高于I~II期患者的(90.43±22.05)ng·L^-1(P＜0.05)。結論 腹腔沖洗液中FGF2增加可能與EMs發病及發展有關。

【關鍵詞】FGF2；子宮內膜異位癥；腹腔沖洗液；酶聯免疫吸附試驗

越來越多的證據表明，子宮內膜異位癥(Endometriosis，EMs)患者與正常人子宮內膜存在許多不同之處，表現為內異癥患者的子宮內膜細胞黏附、侵襲和血管形成能力明顯增強，使之具有異位種植和生長的能力。成纖維細胞生長因子2(Fibroblast Growth Factor 2，FGF2)是人成纖維細胞生長因子(FGFs)家族中的一員，FGF2在細胞的增殖、黏附、血管生成等過程中起著十分重要的作用。本研究擬通過檢測EMS患者及正常人腹腔沖洗液中FGF2的表達，探討FGF2在EMS發生及發展中的作用。

1 材料與方法

1.1 研究對象 EMs組：選取2011年4月~2012年2月期間在本院經婦科手術并經病理證實的子宮內膜異位癥患者45例。年齡30~45歲，平均年齡42.5歲。運用美國生殖學會子宮內膜異位癥分期方法(r-AFS)分期，其中I~II期21例，III ~IV期為24例。對照組：收集同期因卵巢單純性囊腫(18例)、子宮肌瘤(10例)及不孕癥(12例)行腹腔鏡手術治療的非EMs患者共40例為對照組，患者年齡28~41歲，平均年齡38歲。所有婦女月經周期規則，術前6個月無甾體類激素治療史，并排除了內分泌、腫瘤、急性感染等急慢性疾病。

1.2 試劑 人FGF2定量ELISA試劑盒購自北京晶美生物工程有限公司。

1.3 標本處理 進腹后用無菌吸管吸取生理鹽水20 ml注入盆腔，無菌注射器于子宮直腸陷窩抽吸腹腔沖洗液約4~5ml。立即將腹腔沖洗液置于無菌EP管內，低溫下3000 r·min 離心10 min，再收集上清液放人無菌EP管中，置于-70℃冰箱內保存備用。

1.4 檢驗方法 酶聯免疫吸附試驗法(ELISA)檢測人腹腔沖洗液中FGF2蛋白水平，具體操作方法嚴格按照試劑盒說明進行。

1.5 統計學方法 觀測數據為計量數據，用x(-)±s表示，各組間比較采用t檢驗，使用SPSS 13.0統計學軟件進行分析，P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 兩組患者腹腔沖洗液中FGF2濃度 EMs組腹腔沖洗液中FGF2水平達(126.67±39.26) ng·L^-1，顯著高于對照組的(50.31-4-27.33)ng·L^-1(t=8.21，P＜0.01)，見表1。

2.2  FGF2與期別及r-AFS評分的關系EMs組中，III~IV期FGF2水平為(118.75±45.81)ng·L^-1，明顯高于I~II期的(90.43±22.05)ng·L^-1(t=4.08，P＜0.01)，見表2。

3 討論

3.1 FGF2的結構及功能 人源性FGF2基因定位于4q26~27，全長71.53 Kb，有3個外顯子和2個內含子，mRNA全長67.74 Kb，FGF2是參與血管化調控的主要生長因子，可維持血管內皮細胞的存活和增殖，其在細胞的增殖、分化、黏附、血管生成等中起著十分重要的作用。FGF2基因敲除的小鼠表現出血管緊張度缺陷、創傷愈合過程中內皮細胞的遷移受到抑制、創傷愈合延遲等現象，表明FGF2通過控制內皮細胞的增生和遷移來調節血管形成。

3.2 FGF2與EMS的關系 子宮內膜異位癥意指當具有生長功能的子宮內膜組織(腺體和間質)出現在子宮體以外的身體其他部位時稱子宮內膜異位癥(Endometriosis，EMs)。本病具有種植生長、侵襲、遠處轉移和易復發等類似惡性腫瘤的特點。EMs的病因復雜，發病機理仍不十分清楚。最近的研究表明，EMs的存在與病灶內的血管形成與生長緊密相關。

Zhao等研究發現FGF2相關結合受體與子宮內膜異位癥無明顯相關性。而本實驗ELISA實驗結果則提示EMs組腹腔沖洗液中FGF2水平較對照組顯著為高，與Bourlev等研究結果類似，且隨著疾病嚴重程度增加FGF2水平的升高更為顯著。據此認為FGF2與EMs的發生發展有關。推測其可能機制為：返流入盆腔的異位內膜細胞及腹膜間皮細胞分泌FGF2聚集在腹腔內，FGF2作為一種血管化調控的主要生長因子，可促使盆腔異位內膜基底部毛細血管的數量和面積明顯增加，使異位子宮內膜得以生長、增生和分化；同時，腹腔內FGF2的過表達還可募集中性粒細胞匯聚于異位灶，這些炎性細胞分泌的多種炎癥因子及生長因子，反過來刺激腹膜間皮細胞及異位內膜細胞再分泌FGF2，加劇了異位癥的增殖和炎癥反應，從而導致了疾病晚期盆腔的廣泛黏連。

總之，本試驗推測FGF2參與了EMs的發生、發展過程，對闡明子宮內膜異位癥的血管發生機制有重要意義，有望為EMs的診斷、治療及其預后提供一種新方法。

TAG：子宮內膜異位癥 腹腔沖洗液 酶聯免疫吸附試驗