胸腺五肽對嚴重燒傷病人免疫調節作用的研究

來源：中國實驗診斷學雜志作者：百濟動態瀏覽：發布時間：2007/8/10 11:08:00

胸腺五肽對嚴重燒傷病人免疫調節作用的研究

蔣春曉，張馨木，張贏予，常淑芳

(吉林大學藥學院，吉林長春)

【摘要】：目的研究胸腺五肽(Thymopentin，TP-5)對燒傷病人T淋巴細胞亞群及NK細胞的影響。方法對燒傷患者進行雙盲隨機對照臨床研究。檢測治療組(20例)和對照組(20例)病人傷后第2、5、10、17、22天外周血T淋巴細胞亞群及NK細胞，治療組病人從傷后第2天起接受TP-5治療，1- d，肌肉注射，療程20 d；對照組不給予TP-5。結果燒傷后第2天二組病人T淋巴細胞及NK細胞無顯著性差異(P>0．05)；燒傷5、10、17、22天后二組病人T淋巴細胞總數差異顯著(P<0．05)，對照組CD8 細胞顯著高于治療組(P<0．01)，對照組CD4⁺／CD8⁺ ；比值顯著低于治療組(P<0．01)；治療組NK細胞在燒傷5、10、17、22天后均高于對照組(P<0．05)。結論胸腺五肽可作為一種良好的免疫調節劑明顯提高和改善嚴重燒傷患T淋巴細胞及NK細胞功能。

【關鍵詞】：胸腺五肽；燒傷；流式細胞術；免疫調節

燒傷被世界衛生組織確定為世界醫學界十大疑難病癥之一。大量研究表明，嚴重燒傷后病人的免疫功能下降，以T淋巴細胞免疫功能障礙為主。燒傷后，機體細胞免疫功能降低，與全身嚴重感染和多臟器功能衰竭的發生和發展有著密切關系，而全身嚴重感染和多臟器功能衰竭的發生和發展是導致特重燒傷病人死亡的兩個主要原因。因此，采取積極有效的免疫制劑治療特重燒傷成為燒傷治療的重要方案。胸腺五肽(Thymopentin，Tp-5)是胸腺生成素Ⅱ第32～36位的氨基酸殘基片段(精-賴-天冬-纈- 酪)，但保留了胸腺生成素生物學活性，具有和胸腺提取物胸腺素和胸腺肽相同的生理功能和藥效。為探討胸腺五肽對特重燒傷病人細胞免疫的影響，筆者采用流式細胞計數儀(FCM)動態監測經TP．5治療的燒傷病人的外周血T淋巴細胞亞群及NK細胞數的變化。

1 材料與方法

1．1 臨床資料根據 1970年全國燒傷會議制定的燒傷嚴重程度分類標準，選擇2004年7月至2004年12月入院治療40例成年嚴重燒傷病人，將其隨機分為兩組(見表1)。有其他全身性疾病、腫瘤及妊娠期婦女不進入本研究，合并有其他部位嚴重復合傷者也未入選。

治療組從傷后第2天起接受TP-5(海南中和制藥有限公司生產)治療，每日1 rng，肌肉注射，療程20天；對照組不給予TP-5治療，其余治療兩組病人基本相同。兩組病人分別于傷后第5、10、17、22天抽取外周靜脈血2 ml。

1．2 檢測試劑與器材 ①三色直標單克隆抗體：鼠抗人CD3⁺、CD4⁺、CD8⁺ (美國BD公司)；②雙色直標單克隆抗體：鼠抗人CD₃／CD15⁺CD56(美國BD公司)；③FACS Calibur FCM(美國BD公司)。

1．3 檢測指標與方法 不同時間抽取病例外周靜脈血，檢測單核細胞中T淋巴細胞總數(CD3⁺)，T淋巴細胞亞群(CD4⁺、CD8⁺、CD4⁺/CD8⁺)以及NK細胞數。按以下方法進行：

1．3．1 取專用試管4支，依次加入Ig /IgG2/IgC3(對照)、CD3/CD4/CD8三色直標單抗體2o 及ED—TA抗凝血100 ul混勻。

1．3．2 置暗處室溫孵育30 min。

1．3．3 每管加溶血素2 ml，充分混勻，準確暗處放置10 min。

1．3．4 15，000 r/min離心5 min。

1．3．5 棄上清，每管分別加入滌3次。

1．3．6 棄上清，每管加入PBS 5OOul將沉淀懸浮，上機測定。

1．3．7 采用BD公司的Cell Quest軟件進行測定和分析，每次獲取10⁴個細胞。

1．4 統計學處理結果 以 ±s表示，采用t檢驗進行統計分析。

2 結果

對照組和治療組不同時間外周靜脈血中T淋巴細胞亞群及NK細胞的結果見表2(略)、表3(略)。

傷后第2天兩組病人T淋巴細胞亞群及NK細胞數無顯著性差異(P>0．05)。傷后第5、10、17、22天兩組病人T淋巴細胞總數有顯著性差異(P<0．05)，對照組CD₈⁺細胞顯著高于治療組，有顯著性差異(P<0．05)，其比值CD4⁺/CD8⁺ 顯著低于治療組，第5、10天兩組比值有顯著性差異(P<0．05)，第17、22天兩組比值有極顯著性差異(P<0．01)。

3 討論

大量研究表明，嚴重燒傷可導致機體免疫功能下降，主要以細胞免疫功能降低為主，T淋巴細胞表現功能缺陷，數量減少，而T淋巴細胞的減少可影響抗體形成細胞功能。T淋巴細胞功能障礙主要表現為T淋巴細胞亞群CD8⁺細胞增多、CD4⁺/CD8⁺比值減少，且在傷后兩周為明顯，呈倒置現象。本研究結果支持上述論斷。T淋巴細胞中的CD4⁺/CD8⁺比值代表整體的免疫平衡，它們之間有一定比例，以保持適度的免疫應答，如果T淋巴細胞亞群比例失調，則導致細胞免疫功能紊亂。特重燒傷后T淋巴細胞亞群變化的原因較復雜，主要與以下因素有關：燒傷后產生的“燒傷毒素”、“血清不明蛋白”是激活機體產生各種體液因子引起免疫功能低下的重要物質【8,10 ；燒傷時應激反應導致機體免疫能力下降；延誤復蘇，可加重燒傷出現的T淋巴細胞亞群異常；燒傷治療中使用的某些抗菌素可抑制細胞免疫。在特重燒傷的臨床綜合治療中，積極有效的免疫治療是減少并發癥、進一步提高治愈率的有效手段。目前，國內外學者均在尋找一種理想的免疫調節劑。TP-5是胸腺生成素Ⅱ第32~36位氨基酸殘基片段，具有胸腺生成素Ⅱ的全部生理功能，即雙向調節免疫系統功能。筆者給予特重燒傷病人11P一5免疫治療后，發現11P一5具有降低CD8 細胞數量，提高T淋巴細胞的免疫功能，同時它明顯調節CD4⁺/CD8⁺比值，使之趨于平衡，使燒傷病人細胞免疫功能得以恢復、提高，減少傷后感染及其它并發癥的發生率。TP-5免疫調節的作用機理尚無完全闡明，其主要作用是誘導T淋巴細胞分化和與成熟T淋巴細胞特異受體結合，使胞內環磷酸腺苷(CAMP)水平升高介導，從而誘發一系列胞內反應，達到調節免疫功能的作用。最近研究發現TP-5可通過激活包括淋巴細胞在內的單核細胞的蛋白激酶介導細胞分裂增殖，增強細胞免疫功能；并能通過阻斷應激時的腎上腺皮質激素反應調節應激狀態下的機體細胞免疫功能，使CD4⁺/CD8⁺ 比值趨于平衡。

本研究在使用TP-5過程中能明顯改善和提高特重燒傷病人的免疫功能，且未發現任何毒副作用。筆者認為在燒傷病人的治療中，11P一5可作為一種良好的免疫調節劑。

參考文獻：(略)

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