類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎(Rheumatoidarthritis，RA)是一種常見的系統(tǒng)性自身免疫性疾病，RA的基本病理改變是關(guān)節(jié)滑膜的慢性炎癥，增生形成血管翳，侵犯關(guān)節(jié)軟骨、軟骨下骨、韌帶、肌腱等，造成骨吸收、骨破壞和骨纖維化，最終導(dǎo)致關(guān)節(jié)畸形和功能喪失。RA的診斷主要依靠臨床表現(xiàn)、自身抗體的檢測(cè)和影像學(xué)檢查，但早期的RA患者臨床癥狀常不典型，類風(fēng)濕因子特異性相對(duì)較低，X線表現(xiàn)多發(fā)生在關(guān)節(jié)受損之后，多因診斷困難而延誤最佳治療時(shí)機(jī)，因此尋找特異性自身抗體對(duì)RA進(jìn)行早期診斷已成為近年來RA研究的熱點(diǎn)。本文將對(duì)RA自身抗體的研究作一綜述。

 

1、類風(fēng)濕因子(RF)

類風(fēng)濕因子RF是診斷RA最早使用的血清學(xué)指標(biāo)，是針對(duì)人或動(dòng)物IgG分子Fc片斷上抗原決定簇的特異抗體，有IgM—RF、IgG—RF、IgA—RF等類型，但臨床上常檢測(cè)的是IgM—RF，它在RA患者中的陽性率可達(dá)70％～80％，但其特異性不高。除RA外，RF尚可見于其他的自身免疫性疾病中(如干燥綜合征)，感染性疾病(如慢性肺結(jié)核，肝炎)和3％～5％的健康人群中，甚至10％～30％的健康老年人中也可出現(xiàn)。Bas等研究發(fā)現(xiàn)，RA患者的臨床表現(xiàn)和骨侵蝕性的損害主要與RF相關(guān)，故認(rèn)為RF對(duì)預(yù)測(cè)疾病嚴(yán)重性有價(jià)值嘲，Vittecoq等也認(rèn)為，類風(fēng)濕因子RF能更好的預(yù)測(cè)RA患者的影像學(xué)進(jìn)展，雖然RF有相對(duì)較低的特異性，但因其檢測(cè)方便快速，靈敏度高，同時(shí)又是美國(guó)風(fēng)濕病學(xué)會(huì)診斷類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎的分類標(biāo)準(zhǔn)之一，目前仍得到廣泛應(yīng)用。隱性RF：隱性RF是RF與抗原IgG結(jié)合形成的免疫復(fù)合物，其中IgM—RF的活性被遮蔽，用常規(guī)檢測(cè)方法不能檢出，隱性RF在RF陰性的RA患者中陽性率可達(dá)37.5％，它在幼年型RA患者中的陽性率較高，可作為RA檢測(cè)的補(bǔ)充，有助于提高檢測(cè)的敏感性。

 

2、瓜氨酸相關(guān)自身抗體群

2.1 抗瓜氨酸肽抗體(抗CCP抗體)    2000年Schellekens將一條由19個(gè)氨基酸殘基組成的肽段合成為環(huán)瓜氨酸肽(CCP)，以CCP為抗原用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)法在RA患者中檢測(cè)到抗CCP抗體，有很好的敏感性和特異性，分別為60％-75％和85％以上，明顯高于RF。抗CCP抗體在RA早期就可出現(xiàn)，并與關(guān)節(jié)影像學(xué)改變密切相關(guān)，它的臨床應(yīng)用將更有助于對(duì)早期RA的診斷和治療。國(guó)外很多學(xué)者研究認(rèn)為，抗CCP抗體陽性的RA患者骨關(guān)節(jié)破壞程度較陰性者嚴(yán)重，表明抗CCP抗體的檢測(cè)對(duì)預(yù)測(cè)RA患者疾病的嚴(yán)重性具有重要的應(yīng)用價(jià)值。抗CCP抗體檢測(cè)是近年來RA診斷的重大進(jìn)展，特異性明顯優(yōu)于RF，并可以與RF互補(bǔ)，提高RA的診斷率。Vencovsky等認(rèn)為，早期RA骨關(guān)節(jié)破壞與多種自身抗體密切相關(guān)，其中抗CCP抗體和RF是最為敏感的血清學(xué)指標(biāo)，二種抗體的聯(lián)合檢測(cè)能更好的預(yù)測(cè)疾病的進(jìn)展和關(guān)節(jié)破壞程度。Visser等也發(fā)現(xiàn)當(dāng)抗CCP抗體與RF雙陽性時(shí)對(duì)關(guān)節(jié)破壞的預(yù)測(cè)意義更大。雖然抗CCP抗體在RA的診斷中具有很高的特異性和敏感性，但也有報(bào)道認(rèn)為，抗CCP抗體可能也存在于牛皮癬關(guān)節(jié)炎患者中。由于CCP可以大量人工合成，試劑穩(wěn)定，檢測(cè)方法簡(jiǎn)便快速，結(jié)果可靠，因此抗CCP抗體是目前所知的最有希望廣泛應(yīng)用于RA早期診斷的一種抗體，具有廣泛的臨床應(yīng)用和研究前景。

 

2.2 抗角蛋白抗體(AKA)    AKA，即抗鼠食道上皮角質(zhì)層的抗體，對(duì)RA診斷具有特異性。AKA與RA病情嚴(yán)重程度和活動(dòng)性有一定關(guān)系，在RA的早期甚至臨床癥狀出現(xiàn)之前即可出現(xiàn)，因此它是RA早期診斷和判斷預(yù)后的指標(biāo)之一。有報(bào)道稱，AKA陽性的“健康人”幾乎均可發(fā)展成典型的RA。研究發(fā)現(xiàn)，AKA的靶抗原識(shí)別相對(duì)分子量為40kD的聚角蛋白微絲(filaggrin)，其成分含有瓜氨酸，可推測(cè)抗CCP抗體與AKA應(yīng)該有很好的重疊性。

 

2.3 抗核周因子(APF)    APF是用人頰粘膜上皮細(xì)胞做底物，通過間接免疫熒光法發(fā)現(xiàn)的一種RA相關(guān)自身抗體，他們存在于49％～91％的RA患者中，其特異性為73％～99％，國(guó)內(nèi)學(xué)者研究認(rèn)為，APF滴度與RA患者病情活動(dòng)性評(píng)價(jià)等指標(biāo)呈正相關(guān)。APF可以在疾病早期出現(xiàn)，但其檢出率與病程長(zhǎng)短元相關(guān)性，陽性往往提示預(yù)后欠佳，尤其是RF陰性而APF陽性患者。由于作為APF檢測(cè)的抗原片頰粘膜上皮細(xì)胞很難獲取和保存，這在一定程度上限制了它的推廣。

 

2.4 抗聚絲蛋白抗體(AFA)    隨著對(duì)APF、AKA的深入研究，人們逐漸發(fā)現(xiàn)它們有相同的靶抗原，即上皮細(xì)胞分化終末階段的細(xì)胞骨架成分聚角蛋白微絲蛋白(filaggrin)，filaggrin的特異性自身抗體即為AFA。通過對(duì)滑膜組織的研究發(fā)現(xiàn)，AFA由RA患者滑膜組織的漿細(xì)胞分泌，因此，AFA可能參與RA的發(fā)病，并可能與軟骨和骨的破壞有關(guān)。該抗體在滑膜組織中積聚，主要作用于其中的二種蛋白質(zhì)，即p64—78和p55—61，引起自身免疫反應(yīng)，參與RA的發(fā)病，AFA可在RA的早期甚至臨床癥狀出現(xiàn)之前出現(xiàn)，可作為RA早期診斷的指標(biāo)，且該類患者病情進(jìn)展較AFA陰性者快，骨破壞更嚴(yán)重。但由于AFA抗原提取多源于正常人乳房形成術(shù)切除的皮膚及嬰兒包皮，因而限制了臨床應(yīng)用。

 

2.5 抗突變型瓜氨酸波形蛋白抗體(抗MCV抗體)    近年來發(fā)現(xiàn)的抗MCV抗體對(duì)RA具有較高的敏感性和特異性，分別為78％、95％。波形蛋白是重要的細(xì)胞骨架蛋白，它在凋亡的巨噬細(xì)胞內(nèi)被瓜氨酸化，從而改變了蛋白結(jié)構(gòu)并增加了潛在的抗原決定簇，波形蛋白在凋亡細(xì)胞內(nèi)因得不到及時(shí)清除而持續(xù)存在，從而促進(jìn)了抗MCV抗體的產(chǎn)生。抗MCV抗體因其有多個(gè)潛在抗原決定簇而優(yōu)于抗CCP抗體，同時(shí)抗MCV抗體采用ELISA法測(cè)定，操作簡(jiǎn)便快捷，具有廣泛的臨床應(yīng)用和研究前景。

2.6 抗Sa抗體    1994年Despres發(fā)現(xiàn)抗Sa抗體，該抗體在RA中的敏感性為20％～47％，特異性為95％以上。Sa抗原分子量為48～50kD，是存在于人胎盤、脾和RA患者血管翳的一種非核抗原，有研究發(fā)現(xiàn)，抗Sa抗體的靶抗原為瓜氨酸化的波狀蛋白(vimentin)，抗Sa抗體可出現(xiàn)在RA早期并提示預(yù)后不良。Gilles等比較了抗Sa抗體，抗CCP抗體和RF對(duì)早期多關(guān)節(jié)炎患者疾病嚴(yán)重性的評(píng)估，發(fā)現(xiàn)抗Sa抗體可獨(dú)立作為預(yù)示疾病嚴(yán)重性的血清學(xué)指標(biāo)，與關(guān)節(jié)的損害程度密切相關(guān)。由于在抗原底物的獲得和保存上存在技術(shù)困難，以及試驗(yàn)結(jié)果判斷不易標(biāo)準(zhǔn)化，使得無法推廣應(yīng)用。

 

現(xiàn)已有研究證實(shí)AFA、APF、AKA、抗CCP抗體、抗Sa抗體和抗MCV抗體在化學(xué)結(jié)構(gòu)上具有相關(guān)性，均以含瓜氨酸的filaggrin片斷為抗原識(shí)別位點(diǎn)，因此有人將上述抗體統(tǒng)稱為瓜氨酸相關(guān)自身抗體(anti—eitrullinated protein auto antibodies，AC—PA)，但幾種抗體的檢測(cè)結(jié)果并不完全重疊，可以互相補(bǔ)充，幾種抗體的聯(lián)合檢測(cè)可明顯提高RA診斷的敏感性。

 

3、抗Bip抗體

抗Bip抗體的靶抗原為內(nèi)質(zhì)網(wǎng)免疫球蛋白結(jié)合蛋白，屬于熱休克蛋白Hsp家族成員，是分布廣泛的分子伴侶，Bip能刺激RA滑液CD8+T細(xì)胞增殖并產(chǎn)生IL一10等細(xì)胞因子，調(diào)節(jié)炎癥反應(yīng)的發(fā)生。Bip抗體存在于RA患者的滑液和血清中，有文獻(xiàn)報(bào)道，抗Bip抗體在已確診的RA患者中其敏感性和特異性分別為73％和71％，在早期的RA患者中分別為66％和65％，因此抗Bip抗體對(duì)RA的早期診斷有很重要的意義。

 

4、抗RA33抗體

1989年Hassfeld等用免疫印跡法在RA患者的血清中檢測(cè)到RA33抗體，它是能與相對(duì)分子量為33KD的核酸蛋白產(chǎn)生特異性反應(yīng)的IgG型自身抗體。現(xiàn)國(guó)內(nèi)外已公認(rèn)血清抗RA33抗體有助于RA的早期診斷，關(guān)于抗RA33抗體在RA患者中的陽性率國(guó)內(nèi)外報(bào)道不一，其敏感性在35％～45％，特異性可達(dá)90％，抗RA33抗體可出現(xiàn)在早期不典型的RA患者中，但抗RA33抗體不是類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的特異性抗體，它不僅在RA中出現(xiàn)，在SLE和MCTD等病中也有較低陽性率。

 

5、抗Ⅱ型膠原抗體

其靶抗原可能來源于關(guān)節(jié)，并通過介導(dǎo)細(xì)胞及體液免疫反應(yīng)參與關(guān)節(jié)炎的發(fā)生和發(fā)展，溴化氰能把各種屬Ⅱ型膠原消化成若干個(gè)片斷，有類似的位點(diǎn)特異抗體。RA患者的主要位點(diǎn)特異抗體是CBl0、CBll。Ⅱ型膠原蛋白作為一種與RA相關(guān)的抗原，在RA的發(fā)病機(jī)制中起著重要的作用。Andrew等報(bào)道，CBl0可存在于88％的RA患者的血清中，且在早期RA患者中的陽性率高于晚期的RA患者，結(jié)合RF、抗CCP抗體的檢測(cè)，將有更可靠的預(yù)測(cè)疾病的價(jià)值，同時(shí)為我們研究RA的發(fā)病機(jī)制提供了很大的幫助。

 

6抗葡萄糖-6-磷酸異構(gòu)酶抗體(抗GPI抗體)

該抗體是在K／BXN轉(zhuǎn)基因鼠的關(guān)節(jié)炎模型中發(fā)現(xiàn)的，將這種抗體轉(zhuǎn)移給健康小鼠可誘導(dǎo)關(guān)節(jié)炎的發(fā)生。抗GPI抗體為關(guān)節(jié)外抗原致病機(jī)制的研究提供了有意義的證據(jù)。RA關(guān)節(jié)液中抗GPI抗體滴度比血清中明顯提高，表明該抗體可能在滑膜組織局部產(chǎn)生，Jouen等報(bào)道，在RA患者血清中抗GPI抗體的陽性率約為45.4％，但特異性僅75.0％，且抗體的出現(xiàn)與RA患者預(yù)后無關(guān)，抗GPI抗體不是RA的特異性抗體，它也可以存在于其他類型關(guān)節(jié)炎患者中。

 

7抗鈣蛋白酶抑素抗體(ACAST)

鈣蛋白酶是可溶性的鈣依賴半胱氨酸蛋白酶，能夠降解結(jié)締組織基質(zhì)，在RA關(guān)節(jié)炎癥與骨質(zhì)破壞中起著重要作用。鈣蛋白酶抑素是特異性的鈣蛋白酶抑制劑，能夠使活化的鈣蛋白酶失活。目前認(rèn)為鈣蛋白酶一鈣蛋白酶抑素系統(tǒng)參與了類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎的發(fā)病。有報(bào)道認(rèn)為在RA患者體內(nèi)可能存在抗鈣蛋白酶抑素自身抗體(anti-bodies toe alpstatin，ACAST)，ACAST與鈣蛋白酶抑素結(jié)合，使鈣蛋白酶抑素減少，不能有效的降解鈣蛋白酶，致使鈣蛋白酶在關(guān)節(jié)中增多，引起關(guān)節(jié)軟骨基質(zhì)降解和骨破壞。最近waki—Egawa等用紅細(xì)胞鈣蛋白酶抑素作為抗原，用ELISA法檢測(cè)ACAST，結(jié)果顯示，在RA的敏感性為82.8％，特異性96.1％，故認(rèn)為ACAST對(duì)RA診斷具有很高的價(jià)值。

 

8其他抗體

除上述幾種抗體外，RA患者中也可見其他抗體，抗中性粒細(xì)胞胞漿抗體(ANCA)在RA早期就可出現(xiàn)，并可預(yù)測(cè)關(guān)節(jié)損害程度。抗RA相關(guān)核抗原(RANA)抗體可見于65％～95％的RA患者，顯著高于其他結(jié)締組織病，且在RF陰性的RA患者中可有38．5％的陽性率。此外，抗磷脂抗體，抗RNP抗體也可出現(xiàn)在RA患者中，但由于缺乏特異性，敏感性較低，所以很少應(yīng)用于臨床工作中。總之，上述所提到的幾種抗體均有助于對(duì)RA的早期診斷，可提高對(duì)RA診斷的特異性和敏感性，其中抗CCP抗體是最有希望廣泛應(yīng)用于RA早期診斷的抗體。隨著第二代抗CCP抗體的出現(xiàn)，其對(duì)RA診斷的敏感性和特異性明顯提高，Quinn等報(bào)道，第二代抗CCP抗體對(duì)早期的RA患者，特別是血清反應(yīng)陰性的RA患者有很重要的診斷意義。Raza等報(bào)道，第二代抗CCP抗體和RF抗體的聯(lián)合應(yīng)用能更好的預(yù)測(cè)早期滑膜炎RA患者病情的發(fā)展及其嚴(yán)重性，而幾種抗體的聯(lián)合應(yīng)用，可彌補(bǔ)RF對(duì)RA診斷的不足，對(duì)提高RA診斷的陽性率、預(yù)測(cè)RA患者病情的嚴(yán)重性都有很重要的應(yīng)用價(jià)值。

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