貓爪草(Radix Ranunculi Ternati)為毛茛科植物小毛茛的塊根,是二十世紀五十年代河南信陽地區新發現的一種治療結核的新的驗方藥材,后經信陽專署中醫診所依據其根形及能治療鼠瘡的特點而定名為貓爪草[1],2005年版《中國藥典》將其收載。貓爪草以塊根供藥用,性溫,味甘辛,具有消腫、散結的功能,近年來發現其有較好的抗結核及抗腫瘤效果而成為研究的熱點[2],已成為國家重點發展的三類藥材之一。
1 中藥貓爪草的化學成分
有關貓爪草的化學成分的研究報道不多,它的有效成分至今沒有確切報道。經中國醫學科學院藥物研究所測定,貓爪草根含有氨基酸、有機酸和糖。其全草含糖為16%、油為1.2%、植物堿很少[2]。另有報道,貓爪草根及全草呈氨基酸有機酸及糖的反應[3]。
1.1 姚成等[4]對山東、湖北、安徽、新疆及河南5個產地的貓爪草中的氨基酸分析表明,貓爪草所含的氨基酸種類較豐富,達15種之多,其中尤以天冬氨酸、亮氨酸、谷氨酸和精氨酸含量為高。
1.2 日本學者從貓爪草根中分離得到了葡萄糖、阿拉伯糖及半乳糖[5,6],張幸國等[7]從貓爪草中的乙酸乙酯分離得到β-D-葡萄糖。賈慧青等[8]采用比色法測定其可溶性糖含量占10.6 %。
1.3 全山叢等[9]對貓爪草的塊根用原子吸收光譜法測定含有多種人體必需且具有重要生理功能的微量元素,如Zn、Fe、Mn、Cu、Cr等,且以Zn、Fe、Mn含量較高,而肺結核患者頭發中鋅、鐵含量明顯比健康人低。因此認為較高的鋅含量可能對抗肺結核患者由于鋅的降低致機體免疫器官萎縮、免疫細胞受抑制、免疫應答減弱、白細胞殺菌能力下降等的治療有所幫助。
1.4 姜達衢等[10]從其石油醚提取物中分離得到了肉豆蔻酸十八烷基酯、二十烷酸和豆甾醇。郭學敏[11]除分離得到了上述三種化合物外,還分離得到了β-谷甾醇、γ-酮-δ-戊內酯(即小毛茛內酯)以及β-谷甾醇和豆甾醇的D-葡萄糖苷。王愛武等[12]對貓爪草中脂肪酸成分用超臨界流體萃取(SFE)法提取并用氣相色譜-質譜(GC-MS)法從中鑒定出了 12 種化合物,其中主要成分為十六烷酸。陳軍等[13]對貓爪草進行回流提取,提取液經濃縮后進行甲酯化,并用GC-MS法對其脂肪酸及有機酸的成分進行分析和鑒定,其結果表明,貓爪草乙醚提取物中檢測出含有23種物質,鑒定出其中的15種脂肪酸和有機酸。熊英等[14]采用溶劑提取法和柱色譜分離法從醋酸乙酯和正丁醇部位分離鑒定9個化合物,包括粗貝殼杉黃酮-4’-甲醚(I)、榧雙黃酮(I)、羅漢松雙黃酮A、白果素等。
1.5 張海松等[15]對貓爪草的揮發油進行提取并對其進行 GC-MS分析,其結果表明,常規水蒸氣蒸餾法提取的揮發油共鑒定出 61 種成分,其主要化合物為酯、烷烴、芳香族化合物,其中以酯類為主,主要有丁二酸二異丁酯、丁二酸甲基二異丁酯;其次是烷烴,主要有二十五烷、四十烷、四十四烷;芳香族化合物主要有1-甲基萘、2-甲基萘等化合物;此外還有少量的酸、酮、醛、醇、烯以及含硫化合物等。而超聲萃取法提取的揮發油共鑒定出49種成分,其主要化合物為烷烴及酯類化合物,其中以烷烴為主,主要有二二酸二異丁酯、丁二酸甲基二異丁酯;其次是烷烴,主要有二十五烷、四十烷、四十四烷;芳香族化合物主要有1-甲基萘、2-甲基萘等化合物;此外還有少量的酸、酮、醛、醇、烯以及含硫化合物等。
1.6 陳彥等[16]則采用DEAE-Cellulose-52和Superdex 200柱色譜得到一種以β-D-葡萄吡喃糖為主的多糖-蛋白復合物,能增強免疫細胞對腫瘤細胞 HL260 的抑制作用。
2 貓爪草抗結核菌的作用機制研究
2.1 貓爪草的藥理研究證明,貓爪草的三種制劑(煎劑、生藥粉末及醇提液)在試管內對強毒人型結核菌均有不同程度的抑制作用,貓爪草煎劑生藥粉末的抑菌濃度為1:10,其醇提液的抑菌濃度為1:1000,且抑菌較異煙肼強。田菲菲等[17]發現貓爪草提取物對真菌黃瓜炭疽病菌和白菜黑斑病菌在質量濃度為0.01 g/ml的條件下對2種植物病原菌的菌絲生長抑制率超過50%,可作為一種生物農藥考慮。貓爪草的煎劑、生藥粉末及醇提液在試管內對強毒人型結核菌(H37RV)均有不同程度的抑制作用,且抑菌作用比異煙肼稍強。將貓爪草、青蒿水浸液過濾后以1∶200濃度分別制成改良羅氏中藥培養基和對照培養基,經滅菌后分別接種結核菌混懸液,結果對照培養基中結核菌生長良好,而中藥培養基無結核菌生長。
2.2 有人通過對其進行微量元素分析后認為,結核患者頭發中微量元素Zn、Fe、Mn含量明顯比正常人低,貓爪草中較高的Zn、Fe、Mn含量對抗了由于Zn降低導致的肌體免疫細胞抑制,從而減弱了對感染的易感性[18],但這種殺菌機理的理由并不充分。
2.3 詹莉等[19,20]采用反轉錄聚合酶鏈反應半定量(Qc-RT-PCR)方法及聚合酶鏈式反應(PCR)方法,對貓爪草有效成分小毛茛內酯(Tern)進行了抗結核菌分子免疫學機制的研究和貓爪草所含的小毛茛內酯對體外誘導結核病人周圍血管淋巴裂解肽(GLS)基因表達的作用,Tern是從貓爪草中分離提取的一種δ-內脂類化合物,鑒定為γ-酮-δ-戍內酯。GLS是在細胞毒性淋巴細胞和天然殺傷細胞激活晚期被誘導表達的一種多肽,具廣譜抗菌活性,尤其是能殺滅結核菌。因此,GLS基因表達的高低是CTL殺滅胞內細菌分子效能的指標之一,Tern可望作為一種新型的內源性抗生素顆粒裂解肽的誘導劑,治療耐藥結核病。
2.4 貓爪草多糖和皂苷可明顯增強小鼠腹腔巨噬細胞吞噬功能、 促進血清溶血素形成和增加外周血 T淋巴細胞數[21],從而起到抗結核的作用。李君霞[22]則報道以貓爪草多糖對正常小鼠腹腔巨噬細胞吞噬功能的提高作用為最好。
3 貓爪草制劑及臨床應用
由于貓爪草具有消腫、散結等多方面的功效,臨床上早有應用。常用的制劑既包括膠囊、丸劑、散劑、合劑、25%酊劑、煎劑等內服制劑,此外尚有注射液,但多數是醫院自制劑,僅貓爪草膠囊獲得了正式的批準文號并收載在《衛生部藥品標準》中,國內主要由河南信陽市固始制藥廠生產。貓爪草丸劑、膠囊以及療肺散、抗癆靈等中成藥都可用于治療肺結核。10%~15%貓爪草煎劑亦可用于肺結核的局部治療。張志軍[23]采用貓爪草膠囊治療淋巴結結核60例,總有效率98.3%;席秀娥等[24]采用貓爪草膠囊加常規抗結核藥物聯合治療110例頸部淋巴結結核患者,臨床6個月總有效率87.27%,沒有明顯的毒副作用,對異煙肼、鏈霉素耐藥的患者也有一定療效。
4 展望
結核病的重新流行使人類健康再次面臨嚴重威脅,作為單一的傳染源,結核病是造成死亡人數最多的傳染病,而中藥治療結核具有費用低廉、毒副反應少、多靶點等優點,中藥單方和復方在治療結核病中收到了理想的臨床效果,對治療結核病具有較強的應用前景。貓爪草具有較好的抗結核效果,但開發利用度不夠,制劑生產未成規模,目前以貓爪草為原料并獲批準并生產的仍然僅為貓爪草膠囊一種。因此有必要對貓爪草進行深入研究,針對貓爪草的有效成分和活性部位不明確問題,著重進行其有效部位及有效成分的篩選,為貓爪草的進一步開發利用提供科學依據,從而為開發新型高效的治療結核病藥物打下基礎。
參 考 文 獻
[1] 杜文平,李領娥. 貓爪草治療淋巴結核[J]. 中國民間療法,2001,9 (12) :47.
[2] 李嘉玉,劉道矩,劉濟寬. 中藥貓爪草治療頸淋巴結結核180例的分析[J]. 天津醫藥雜志,1964,6 (11) :958.
[3] 江蘇省植物研究所. 新華本草綱要(第一冊)[M]. 上海:上?萍汲霭嫔,1988:133-135.
[4] 姚成,陳軍,歐陽平凱. 中藥貓爪草氨基酸的測定[J]. 林產化學與工業,2003,23 (2):971.
[5] Iriky,Furutas sugars of Ranunculus ternatus Var glaber. I. 日本農蕓化學會志,1972:46:411-412.
[6] Iriky,Furutas sugars of Ranunculus ternatus Var glaber. I. 日本農蕓化學會志,1975 ;49:7-9.
[7] 張幸國,田景奎. 貓爪草化學成分的研究Ⅲ[J]. 中國藥學又?2006,41 (19)):1460-1461.
[8] 賈慧青,范智超,薛生全. 貓爪草多糖及蛋白含量測定[J]. 時珍國醫國藥,2006,17(5):736-737.
[9] 全山叢,汪學昭,鄭漢臣,等. 中藥貓爪草的微量元素分析[J]. 微量元素與健康研究,1997,14 (2):291.
[10] 姜達衢,黃筱美. 貓爪草化學成分的研究[J]. 中國中藥雜志,1993,18(9):550.
[11] 郭學敏,周卓輪,洪永福. 貓爪草的化學成分研究[J]. 藥學學報,1995,30 (12):931.
[12] 王愛武,袁久榮,李磊,等. 貓爪草脂肪酸成分的超臨界流體萃取及GC-MS分析[J]. 中藥材,2006,29 (5):485-486.
[13 陳軍,姚成,夏黎明,等. 貓爪草中的脂肪酸及有機酸GC-MS分析[J]. 光譜學與光譜分析,2006,26(8) :1550-1551.
[14] 熊英. 貓爪草中黃酮類與苷類化學成分的研究[J]. 中草藥,2008,39(10):1449-1452.
[15] 張海松,岳宣峰,張志琪. 貓爪草揮發油的提取及其化學成分的GC-MS分析[J]. 中國中藥雜志,2006,31(7):609-611.
[16] 陳彥,戴玲,沈業壽. 貓爪草多糖RTG2III的分離純化及其生物活性[J] .中國藥學雜志,2004,39(5):339-342.
[17] 田菲菲,蔣繼志,沈鳳英,等. 1126種中草藥提取物對兩種植物病原菌的抑菌活性[J]. 華北農學報,2006,21(S1):131-132.
[18] Lehrer RI,Ganz T. Antimicrobial peptides in mammalian and inset hos defense. Cur Pin Immunol,199;11(1) :23-25.
[19] 詹莉. 小毛茛內酯對結核病人顆粒裂解肽基因表達的作用[J]. 中國藥理學通報,2001,17(4):405-408.
[20] 詹莉. 小毛茛內酯對結核休眠感染病人GLS mRNA表達的影響[J]. 中國防癆雜志,2001,23(5):275-277.
[21] 張振凌,吳筱菁. 中藥貓爪草有效部位的免疫活性研究[J]. 中華中醫藥雜志(原中國醫藥學報),2007,22(2):120-122.
[22] 李君霞,胡澤開. 貓爪草提取物對正常小鼠免疫功能的影響[J]. 醫藥論壇雜志,2005,30(21):75-76.
[23] 張志軍,裴桂芬. 貓爪草膠囊治療淋巴結結核60例療效分析[J]. 內蒙古中醫藥,2007,26(2):26-27.
[24] 席秀娥,尚好珍,張會強. 貓爪草膠囊治療200例結核性胸膜炎的療效觀察[J]. 中國民康醫學,2008,20(13):1441-1442.