老鸛草是我國常用中藥,2005版藥典規(guī)定其正品為牻牛兒苗科牻牛兒苗屬植物牻牛兒苗(Weodium stephanianum Willd.)、老鸛草屬植物老鸛草(Geranium wilfordii Maxim.)或野老鸛草(Geranium carolinianum L)的干燥地上部分。具有祛
風(fēng)濕,通經(jīng)絡(luò),止瀉痢之功效[1],主治風(fēng)濕痹痛,麻木拘攣,筋骨酸痛,泄瀉痢疾[2]。鼠掌老鸛草作為老鸛草藥材來源之一,藥典雖未收載,但其在東北分布廣泛,應(yīng)用較多。故本實驗以鼠掌老鸛草為研究對象,對其較強的抗
腹瀉作用進行藥理機制研究;并通過藥效學(xué)實驗深入比較鼠掌老鸛草與藥典收載的老鸛草藥理作用,對鼠掌老鸛草的進一步開發(fā)利用提供科學(xué)的品質(zhì)評價依據(jù),為進一步擴大新藥源打下堅實的基礎(chǔ)。
1 實驗材料
1.1 試藥與試劑 番瀉葉水煎液(8%)、老鸛草水煎液、鼠掌老鸛草水煎液,苦味酸試劑,腹可安片(廣東在田藥業(yè)有限公司 生產(chǎn)批號20060101);炭末、生理鹽水、
易蒙停(西安楊森制藥有限公司生產(chǎn),批號 050826202)、 新斯的明注射液(上海信誼金朱藥業(yè)有限公司生產(chǎn),批號 050304)。
1.2 實驗動物 昆明種小鼠(18~22g),遼寧中醫(yī)藥大學(xué)動物試驗中心提供。
1.3 實驗儀器 小鼠代謝籠、注射器、灌胃器(1ml)、Acculab電子天平、乳膠手套、濾紙、手術(shù)剪、眼科鑷、搪瓷盤或硅板、直尺。
2 方法與結(jié)果
2.1 對番瀉葉引起小鼠實驗性腹瀉的影響 取體重(20±2)g健康雄性小鼠70只,隨機分為空白對照組、模型對照組、陽性對照組、老鸛草組、鼠掌老鸛草高、中、低劑量組,每組10只;除空白對照組和模型對照組外,其余各組均灌胃給藥,每日1次,連續(xù)3日。于末次給藥1h后以8%番瀉葉水煎劑按0.5ml/20g灌胃,分籠觀察,每鼠一籠,籠下鋪置吸水紙作濕糞計數(shù),以濕糞多少表示泄瀉程度,計算各鼠8h累積腹瀉次數(shù)。用t檢驗方法比較累積濕糞數(shù),比較各給藥組與對照組濕糞數(shù)差異[3]。結(jié)果見表1。鼠掌老鸛草水煎液與模型對照組比較,中、高劑量組對番瀉葉所致小鼠瀉下均有明顯抑制作用,低劑量組對番瀉葉所致小鼠瀉下的抑制作用不明顯。表1 對番瀉葉引起小鼠實驗性腹瀉的影響 (略)注:與模型對照組比較,△P<0.05;與空白對照組比,★P<0.05
2.2 對胃腸運動功能的影響
2.2.1 正常小鼠小腸推進運動的影響 取體重(20±2)g的純種健康昆明種小鼠60只,雌雄各半;隨機分為空白對照組、陽性對照組、老鸛草組、鼠掌老鸛草高、中、低劑量組,每組10只;灌胃給藥,每日1次,連續(xù)3日。實驗前禁食20~24h,不禁水。實驗時用以上六種炭末混懸液按0.5ml/20g體重灌胃。給藥20~30min后,脫頸椎處死,打開腹腔,分離腸系膜,剪去上端至幽門,下端至回盲腸部腸管,置于搪瓷盤上,輕輕將小腸拉成直線,測量腸管長度,作為“小腸總長度”,從幽門直至炭末前沿距離作為“炭末在腸管內(nèi)推進的距離”,取各組小鼠平均值,用公式推算出炭末推進百分率[4]。并注意觀察小腸容積是否增大。對結(jié)果進行統(tǒng)計學(xué)處理,結(jié)果見表2。鼠掌老鸛草水煎液與空白對照組比較,中、高劑量組對正常小鼠小腸推進有抑制作用。低劑量組沒有表現(xiàn)出明顯的抑制作用。鼠掌老鸛草對正常小鼠小腸推進抑制作用沒有老鸛草作用明顯。表2 對正常小鼠小腸推進運動的影響 (略)注:與空白對照組比較,△P<0.05
2.2.2 對推進機能亢進小腸運動的影響 選取體重(20±2)g的純種健康昆明種小鼠70只,雌雄各半;隨機分為空白對照組、模型對照組、陽性對照組、老鸛草組、鼠掌老鸛草高、中、低劑量組,每組10只。灌胃給藥,每日1次,連續(xù)3日。實驗前禁食20~24h,不禁水。實驗時用以上六種炭末混懸液按0.5ml/20g體重灌胃,并肌肉注射新斯的明0.3ml/10g。給藥20~30min后,脫頸椎處死,打開腹腔,分離腸系膜,剪去上端至幽門,下端至回盲腸部腸管,置于搪瓷盤上,輕輕將小腸拉成直線,測量腸管長度,作為“小腸總長度”,從幽門直至炭末前沿距離作為“炭末在腸管內(nèi)推進的距離”,取各組小鼠平均值,用公式推算出炭末推進百分率。并注意觀察小腸容積是否增大。對結(jié)果進行統(tǒng)計學(xué)處理,結(jié)果見表3。鼠掌老鸛草水煎液與模型對照組比較,中、高劑量組能顯著抑制推進機能亢進小鼠的小腸運動,低劑量組沒有表現(xiàn)出明顯的抑制作用。鼠掌老鸛草對推進機能亢進小鼠小腸抑制作用沒有老鸛草作用明顯。表3 對推進機能亢進小腸運動的影響 (略)注:與模型對照組比較,△P<0.05;與空白對照組比較,★P<0.05
3 討論
本文研究表明鼠掌老鸛草水煎液的高、中劑量組能明顯的減少番瀉葉引起的小鼠腹瀉次數(shù)。鼠掌老鸛草水煎液對番瀉葉所致小鼠濕糞顆粒增加均有明顯抑制作用,可見其有止瀉作用。鼠掌老鸛草水煎液對正常小鼠小腸運動有抑制作用,對推進機能亢進小鼠小腸運動也有抑制作用,提示鼠掌老鸛草對正常及功能亢進狀態(tài)的胃腸活動均有抑制作用。
腹瀉是多種疾病的常見癥狀,可表現(xiàn)為胃腸黏膜發(fā)炎,水腫,運動機能亢進,出現(xiàn)稀便和便頻等癥狀。根據(jù)病因可分為感染性和非感染性腹瀉,由腸道細(xì)菌感染引起的腹瀉首選抗菌藥物進行治療。除抗菌藥物外,臨床常用的止瀉藥物包括:阿片類制劑、易蒙停、鞣酸蛋白等。本實驗中所采用的陽性對照藥物易蒙停通過直接抑制腸道蠕動,減少腸壁神經(jīng)末梢釋放乙酰膽堿,從而產(chǎn)生明顯的止瀉作用。
新斯的明引起腹瀉的機理為:通過抑制乙酰膽堿酯酶,抑制乙酰膽堿滅活,從而使腸蠕動加快。本品能夠?qū)剐滤沟拿饕鸬母篂a,推測其可能具有M受體阻斷作用。此外,由于本品中含有一定量的鞣質(zhì),推測其也可能通過與腸黏膜表面的蛋白質(zhì)形成沉淀,附著于腸黏膜上,減輕刺激,減少炎性滲出物,從而起到收斂止瀉的作用。(參考文獻:鼠掌老鸛草與老鸛草抗腹瀉藥理作用的比較研究,何靜,中華現(xiàn)代中醫(yī)學(xué)雜志2006年第2卷第7期)