癲癇康膠囊是由黨參、白術(shù)、茯苓、陳皮、制半夏、炙甘草、膽南星、全蝎、僵蠶等藥經(jīng)提取制成的純中藥制劑;具有補(bǔ)脾益氣,祛痰化濕,開竅定癇之功效,用于治療脾虛痰濕之癲癇病。臨床研究證實(shí)該藥對癲癇病具有較好的治療效果。我們應(yīng)用硫酸鋅所致家兔癲癇模型對癲癇康膠囊進(jìn)行了藥理研究。
1 試驗(yàn)材料
1.1 試驗(yàn)樣品 癲癇康膠囊,批號:20010312;給藥前,將癲癇康膠囊用蒸餾水配置成23.1%、11.5%和5.75%(V/V)的液體。
1.2 試驗(yàn)動物 健康成年雄性家兔49只,體重2.0~2.5kg。
1.3 飼養(yǎng)條件 溫度(22±2)℃,濕度(50±10)%,光照12h?日-1,排氣通風(fēng)2次/日,單性分籠飼養(yǎng),飼料為家兔全價營養(yǎng)飼料和青飼料。
1.4 試驗(yàn)儀器 多導(dǎo)生理記錄儀(日本光電公司);721分光光度計(上海)。
1.5 對照藥物:苯妥英鈉片(江蘇鹽城制藥有限公司,批號20020105),給藥前,用蒸餾水將3片配置成100mL。
1.6 其它材料 硫酸鋅(廣州化學(xué)試劑廠,批號20011102-1),使用前用蒸餾水配置成2.0% 的溶液。
2 試驗(yàn)方法
2.1 動物分組和給藥 動物依體重隨機(jī)分層均分為5組:
(1)癲癇康膠囊3.00g?kg-1;
(2)癲癇康膠囊1.50g?kg-1;
(3)癲癇康膠囊0.75g?kg-1;
(4)苯妥英鈉30mg?kg-1;
(5)蒸餾水10.0g?kg-1。
每日插胃管ig給藥1次,給藥容量為10.0mL?kg ;
2.2 動物手術(shù) 動物給藥14d后在戊巴比妥鈉25mg?kg ip麻醉下實(shí)施手術(shù),并輔以2%普魯卡因局部麻醉。將家兔頭部固定在立體定位儀上,無菌條件下暴露顱骨,依照Sawyer圖譜在P4,LL4.5,LR4.5,H6處置入外徑為1.0mm 的聚乙烯塑料管(內(nèi)經(jīng)不銹鋼針導(dǎo)引),用以置入記錄海馬放電的電極和注射藥物。注射藥物內(nèi)管直徑為0.6ram,長7.5mm,記錄海馬放電的電極為外周絕緣的銀絲(直徑0.5mm,長7.5mm),僅在實(shí)驗(yàn)時置入。此外,在A10,P10,LL3,RL3處分別用骨鉆開4個直徑為lmm的小孔,保護(hù)硬腦膜的完整性,同時置入4個記錄ECoG的不銹鋼電極,以牙托粉固定。術(shù)后肌肉注射青霉素10萬單位/只。
2.3 試驗(yàn)觀察和EHG記錄 術(shù)后24h再次給藥,給藥后20min進(jìn)行實(shí)驗(yàn)觀察。首先引導(dǎo)正常的EHG,掃描速度200msec/格,放大倍數(shù)100 uv/格,高頻濾波30Hz。記錄時間1.5min。結(jié)果描記在日本光電公司生產(chǎn)的多導(dǎo)電生理記錄儀上。而后將注射藥物內(nèi)管經(jīng)塑料管插入到海馬區(qū)域,由內(nèi)管直接緩注射時間為5min,注射結(jié)束后針管保留5min后取出,分別在注射ZnSO 前(正常)、注射ZnSO 結(jié)束后30min、1h、2h、4h、8h和24h(24h記錄前30min再次給藥),記錄雙側(cè)EHG。同時按照癲癇發(fā)作的行為表現(xiàn)觀察及記錄動物行為(將動物行為由輕至重分為6級。0級:安靜;1級:口或面部抽動;2級:點(diǎn)頭,轉(zhuǎn)圈,濕狗反應(yīng);3級:前肢陣攣,咀嚼流涎;4級:直立陣攣;5級:立起和跌倒交替出現(xiàn);6級:發(fā)作過度導(dǎo)致死亡)。試驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)分析,組間進(jìn)行t檢驗(yàn)。
3 試驗(yàn)結(jié)果
3.1 癲癇康膠囊對實(shí)驗(yàn)性癲癇發(fā)作行為表現(xiàn)的影響 海馬內(nèi)注射ZnSO4后,家兔產(chǎn)生明顯的癲癇復(fù)合性局限性陣攣性發(fā)作。表現(xiàn)為自由活動增加,呈探索行為。一般癥狀表現(xiàn)為面部抽動,咀嚼,點(diǎn)頭,跑動,雙前肢陣攣,濕狗行為,伴有嗅、舐活動,流涎,大小便增加。少數(shù)動物出現(xiàn)全身性陣攣性發(fā)作,表現(xiàn)為頸和雙前肢伸直,呈現(xiàn)直立陣攣,全身肌肉抽動,失去平衡而后倒,甚至因發(fā)作過度而死亡。結(jié)果表明,與模型對照組相比,癲癇康膠囊大劑量、中劑量組注射ZnSO4后1,2,4h,癲癇發(fā)作有明顯減輕(P<0. 05、P<O.01)。
3.2 癲癇康膠囊對癲癇模型家免EHG癇樣放電頻率及波幅的影響海馬內(nèi)注射ZnSO4后,EHG出現(xiàn)持續(xù)高頻高幅的癇樣放電。癲癇康膠囊大劑量組在注射ZnSO4后2、4、8、24h,EHG癇樣放電頻率均顯著低于模型對照組(P<0.05,P<0.01)。大劑量組EHG放電波幅增加值在注射ZnSO 后4、8h也明顯低于模型對照組(P<0.05,P<0.O1)。中劑量組在注射ZnSO4后1、2、4、8、24hEHG癇樣放電頻率和注射后4hEHG的放電波幅增加值與模型對照組相比亦有顯著差異(P<0.05,P<0. 01)。小劑量組在注射ZnSO 后4、8h EHG癇樣
放電頻率和注射后8h EHG的放電波幅增加值與模型對照組相比亦有顯著差異(P<0.05,P<0.01)。
4 結(jié)論與討論
通過癲癇模型家兔的行為、EHG的癇樣放電頻率和波幅的影響試驗(yàn),表明癲癇康膠囊能明顯改善因海馬內(nèi)微量注射ZnSO 所產(chǎn)生的癲癇復(fù)合性局限性陣攣性發(fā)作嚴(yán)重程度,縮短發(fā)作的時間,減少ZnSO所致的ECoG癇樣放電頻率和波幅的增加。
癲癇病是指先天遺傳或大驚卒恐,情志失調(diào),飲食不節(jié),以及繼發(fā)于腦部疾患,高熱、中毒、頭顱損傷等,使風(fēng)痰、瘀血等蒙蔽清竅,擾亂神明,以突然昏仆,口吐涎沫,肢體抽搐,移時自醒,反復(fù)發(fā)作為典型表現(xiàn)的腦系疾病。常見于現(xiàn)代醫(yī)學(xué)所說的原發(fā)性癲癇或繼發(fā)性癲癇病。
癲癇康膠囊膠囊方中黨參甘溫扶脾養(yǎng)胃,補(bǔ)中益氣,使脾胃健旺,運(yùn)化力強(qiáng),資生氣血,因脾胃易生濕化痰,故用白術(shù)苦溫,健脾燥濕,扶助運(yùn)化;茯苓甘淡,合白術(shù)以健脾滲濕;炙甘草補(bǔ)中和胃;制半夏理氣化痰;以上六味藥名為六君子湯,出自《醫(yī)學(xué)正傳》,共用有甘溫益氣,健脾養(yǎng)胃,理氣化痰之功效;本方中天麻、全蝎、僵蠶配用以平肝熄風(fēng)鎮(zhèn)痙,現(xiàn)代藥理研究;天麻具有抗驚厥、鎮(zhèn)靜、鎮(zhèn)咳祛痰作用;全蝎具有鎮(zhèn)靜、解痙、破瘀散結(jié),搜風(fēng)通絡(luò)作用;僵蠶具有抗驚厥作用;膽南星豁痰開竅,清火化痰,鎮(zhèn)靜定癇,加木香行氣助脾健運(yùn)。通過調(diào)理脾胃,使脾胃健運(yùn),氣機(jī)調(diào)暢,祛除痰濁,一方面使之不再擾亂神志,另一方面可使水谷之精微化生正常,營血充足,而保持神志活動正常;由于脾胃氣機(jī)調(diào)暢,其升清降濁之轉(zhuǎn)疏作用正常,其他臟腑氣機(jī)都能得到調(diào)整,因而達(dá)到治療目的。