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羅補甫克比日丸專題 >> 臨床研究成藥羅補甫克比日(丸)中人體必需微量元素和蛋白質(zhì)的含量
臨床研究成藥羅補甫克比日(丸)中人體必需微量元素和蛋白質(zhì)的含量
- 來源： 百濟新特藥房網(wǎng) 發(fā)布時間：2011-7-18 16:28:47
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1 材料與儀器
1.1 材料 維吾爾醫(yī)成藥羅補甫克比日丸自新疆和田地區(qū)維吾爾醫(yī)院制藥廠購買。
1.2 試劑與儀器 牛血清白蛋白（上海化學(xué)試劑采購供應(yīng)站），電泳純；硫酸銅，GR；酒石酸鉀鈉，GR；氫氧化鈉，GR；標準品蘆丁（上海化學(xué)試劑公司），BR；HNO3，GB；HCl，GB；11種元素的系列標準溶液，均有標準儲備溶液稀釋而得。測定與分析用水均為超純水。
754紫外分光光度計（上海儀器分析廠）；日立-518型原子吸收光譜儀。
2 蛋白質(zhì)含量的測定
2.1 蛋白質(zhì)的定性 稱取樣品適量，用蒸餾水浸泡12h，過濾，備用。
2.1.1 雙縮脲反應(yīng) 取樣品液1ml加10%NaOH液5滴，搖勻，再逐滴加入1%CuSO4溶液2滴再搖動，出現(xiàn)藍紫色。
2.1.2 黃色反應(yīng) 取樣品液1ml，加濃硝酸5滴出現(xiàn)蛋白質(zhì)沉淀，用微火小心加熱沉淀變成黃色，冷卻后，逐滴加入10%NaOH液，當(dāng)反應(yīng)液呈堿性時，顏色由黃色轉(zhuǎn)變成深橙黃色。
2.1.3 茚三酮反應(yīng) 取樣品液1ml，加0.5%茚三酮乙醇溶液4滴，在水浴中加熱5min，冷卻，均呈藍紫色。結(jié)果表明羅補甫克比日丸含有蛋白質(zhì)。
2.2 雙縮脲試劑的制備 依次溶解1.5g硫酸銅和6.0g酒石酸鉀鈉于500ml超純水中，在不斷攪拌中加入10%氫氧化鈉300ml，用超純水稀釋1000ml，密閉保存?zhèn)溆谩?nbsp;
2.3 標準牛血清白蛋白的制備 溶解牛血清白蛋白于超純水中，配制成濃度為1.0mg/ml、2.0mg/ml、3.0mg/ml、4.0mg/ml、5.0mg/ml，用分光光度計校正其正確濃度（A1%280=6.60）。
2.4 樣品（羅補甫克比日丸）的制備 用電子分析天平稱取羅補甫克比日丸2.0001g，研磨，加稀鹽40ml，浸泡24h，過濾，把濾液轉(zhuǎn)移至50ml容量瓶中稀釋刻度，保存?zhèn)溆谩?nbsp;
2.5 標準曲線 吸取不同濃度（1～5mg/ml）的標準牛血清白蛋白溶液各1.0ml加入雙縮脲試劑4.0ml，混合均勻，于25℃水浴中保溫30min。然后用分光光度計與波長λ=550nm讀取A（吸光度）值，讀時以1ml超純水加4.0ml雙縮脲試劑為比色空白對照。最后以標準蛋白質(zhì)濃度Ｃ為橫坐標，以吸光度Ａ為縱坐標，繪制標準曲線，用最小二乘法經(jīng)線性回歸，蛋白質(zhì)濃度（C）與吸光度（Ａ）的關(guān)系曲線的回歸方程式: A=0.0867C（0.102667=0.0867C），相關(guān)系數(shù)為R2=0.993，所以本實驗檢測方法中蛋白質(zhì)濃度與吸光度有良好的相關(guān)性。
2.6 計算羅補甫克比日丸中蛋白質(zhì)含量 用上述同樣方法，測得樣品中的A550，然后在標準曲線上查得樣品中蛋白質(zhì)含量為29.6026%。
2.7 加樣回收率的測定 取標準樣溶液，加牛血清白蛋白0.3mg，其他步驟與標準曲線制作相同，測定吸光度，平均回收率為95%～103%。
3 微量元素的測定
3.1 試液制備 取藥材樣品適量，用研缽研磨為細粉，上述藥粉，在電子分析天平上準確稱取5.0002g，馬福爐中低溫灰化，最后750℃保持8h，使完全灰化。然后用2ml濃硝酸和6M鹽酸2ml分次溶解灰化物于25ml容量瓶中，加超純水至刻度。
3.2 測定方法及測定條件 用日立-518型原子吸收光譜儀，以空氣-乙炔火焰分別測定各元素的含量。測定條件見表1。
3.3 羅補甫克比日丸中微量元素的測定結(jié)果 見表2（略）。表1 11種微量元素測定條件表2 羅補甫克比日丸中微量元素的含量
3.4 回收率的測定 為了驗證上述結(jié)果的可靠性，筆者對以上8元素進行了回收實驗。回收率為：Ca 94%～102%，F(xiàn)e 93%～103%，Cu 91%～101%，Zn 93%～102%，Mn 91%～102%，K 93%～102%，Na 92%～104%，Mg 96%～100%表明該方法可行。
4 討論
（1）蛋白質(zhì)廣泛存在于自然界，是一類重要的天然營養(yǎng)物質(zhì)，羅補甫克比日丸中的蛋白質(zhì)是植物性營養(yǎng)蛋白質(zhì)。生命是物質(zhì)運動的高級形式，種運動形式是通過蛋白質(zhì)來實現(xiàn)的，故蛋白質(zhì)具有多方面生理活性。羅補甫克比日丸中蛋白質(zhì)含量較多即29.6026%，蛋白質(zhì)經(jīng)消化系統(tǒng)水解成人體必需的各種氨基酸容易被人體吸收，有滋補強壯、精液濃縮、益精壯陽、提神和提高人體免疫力的作用。因此，羅補甫克比日丸是一種營養(yǎng)價值或生理價值很高的，能補腦健身、益心填精，是具有營養(yǎng)和治療作用的維吾爾醫(yī)藥。
（2）由表2可知，羅補甫克比日丸Mg、Ca、K、Na和Zn的含量較高，F(xiàn)e和Cu含量次之，其他微量元素的含量較低。隨著營養(yǎng)學(xué)家對人體微量元素的深入研究，微量元素對人體內(nèi)的細胞代謝、生物合成及生理生化功能起著重要作用。微量元素對人體內(nèi)血紅蛋白的合成，皮膚、骨骼和性器官的正常發(fā)育都有重要作用；并與造血和脂肪代謝也有密切關(guān)系。微量元素還參與人體內(nèi)多種酶的結(jié)構(gòu)與激活，在構(gòu)成體內(nèi)重要的載體及電子傳遞系統(tǒng)方面具有重要作用。
微量元素在人體中保持一定的水平，維持人體的正常活動，若失去平衡，就會導(dǎo)致疾病的發(fā)生。微量元素必須從人體外攝取，人體自身不能產(chǎn)生。
微量元素是中藥和維藥歸經(jīng)與物質(zhì)基礎(chǔ)的主要組成部分，因此，中藥和維藥的療效不僅與其有機成分有關(guān)，還與其所含的無機元素的種類及含量有密切關(guān)系。微量元素的研究對維藥的性味功能、質(zhì)量鑒定、臨床應(yīng)用等方面有著重要意義。維藥的微量元素除能直接補充和調(diào)節(jié)人體內(nèi)的必需而參與機體各種生理生化過程，起到營養(yǎng)及防治疾病作用外，還常與維藥中的藥效有機成分形成復(fù)合物，產(chǎn)生協(xié)同或拮抗作用，從而增強維藥療效。羅補甫克比日丸的作用很可能與其含有的蛋白質(zhì)含量及對人體有益微量元素特別是鎂、鈣、鋅、鐵和銅等元素密切相關(guān)。所以，進一步地研究羅補甫克比日丸化學(xué)成分的種類，具有很重要的意義。
TAG：羅補甫克比日丸
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