天麻壯骨丸是由天麻、人參、秦艽等2O味中藥材組成,具有祛風除濕、活血通絡、補肝腎、強腰膝之功效。天麻壯骨丸主治
風濕阻絡、偏正頭痛、頭暈、風濕痹痛、腰膝酸軟、四肢麻木等癥。天麻壯骨丸的標準收載于《四川省藥品標準》1993年版(中成藥成方制劑),在天麻壯骨丸質量標準中可控項目非常少。為控制天麻壯骨丸的質量,特考慮用薄層色譜法對制劑中的人參、秦艽進行定性鑒別,為該品種建立完善的質量控制體系提供可靠依據。
儀器與試藥:CQ-25o型超聲波清洗器(上海超聲波儀器廠),LD-2A型離心機,硅膠G(青島海洋化工廠),D101型大孔樹脂柱,ZF-1三用紫外分析儀(上海精科實業有限公司),自制薄層板(5cm×20cm,0.3mm)。所用試劑均為分析純。天麻壯骨丸樣品,人參皂苷Rgl對照品、人參皂苷Re對照品、人參皂苷Rbl對照品、龍膽苦苷對照品(均從中國藥品生物制品檢定所購買)。
方法:人參的鑒別取本品20g,研細,加甲醇80mL,超聲處理40min,放冷,濾過,濾液蒸干。殘渣加氨試液20mL使其溶解,用三氯甲烷振搖提取3次,每次20mL,棄去三氯甲烷液,氨試液用水飽和的正丁醇提取3次,每次20mL,合并正丁醇提取液,蒸干。殘渣加氨試液5mL使其溶解,加于D101型大孔吸附樹脂柱(內徑1.5cm,柱高12cm)上,用氨試液100mL洗滌,棄去氨洗滌液,再用水洗滌至中性,棄去水洗滌液,再用30乙醇50mL洗滌,棄去30 乙醇洗滌液,繼用7O 乙醇50mL洗脫,收集洗脫液,蒸干,殘渣加甲醇lmL使溶解,作為供試品溶液。另取人參皂苷Re對照品,加甲醇制成每lmL含0.5mg的溶液,作為對照品溶液。照薄層色譜法(中國藥典2005年版一部附錄ⅥB)試驗,吸取上述2種溶液各5~ l0 1,分別點于同一以羧甲基纖維索鈉為黏合劑的硅膠G薄層上,分別以三氯甲烷一甲醇一水(13:7:2)10℃ 以下放置過夜的下層溶液和三氯甲烷一乙酸乙酯一甲醇一水(15:4O:22:10)10℃ 以下放置的下層溶液為展開劑,展開,取出,晾干,噴以lO 硫酸乙醇溶液,在105℃ 加熱至斑點顯色清晰,置紫外光燈(365nm)下檢視。
結果:供試品色譜中,在與對照品色譜相應的位置上,顯相同顏色的芡尤斑點。用缺人參的陰性樣品20g,同法制成陰性對照溶液,經展開、顯色后觀察,結果在陰性供試品色譜中,與對照品色譜相應的位置上,不顯相同顏色的斑點。
由于天麻壯骨丸由2O味中藥材組成,在處方中,天麻屬君藥。本應優先考慮其天麻壯骨丸含量測定及薄層色譜鑒別。但在研究其含量測定過程中,發現無論采取何種方法,均無法對天麻壯骨丸進行有效分離。在進行天麻薄層色譜研究時,采用了多種提取方法及顯色劑,均無法清晰地鑒別出天麻壯骨丸中蛇床子素的特征斑點。可能是因為天麻壯骨丸處方中傘形科類藥材較多,所含化學成分極為相近,相互之間有干擾,很難單獨鑒別出某一味傘形科藥材,實驗過程中曾采用薄層色譜法,考察了蛇床子素、白芷、防風、羌活、當歸、川芎 。結果發現在蛇床子素對照品色譜相應的位置上,有多味藥材均在相同位置上有相同的斑點,不能排除陰性干擾,故無法對君藥天麻進行薄層色譜鑒別。
在做人參的薄層色譜鑒別過程中,也曾以人參皂苷Rbl、Rgl作為對照品,但在供試品色譜中,與人參皂苷Rbl、Rgl對照品色譜相應的位置上,斑點不明顯,分離度較差,無法判斷其斑點的專屬性,故未列人參皂苷Rbl、Rgl的薄層色譜鑒別。文中所述天麻及秦艽的薄層色譜鑒別,均采用相應的藥材溶液和陰性溶液作對照,并進行了3批樣品實驗。結果表明,各檢出成分不受其他成分的干擾,專屬性強,重復性好,方法簡便。
(本文節選自《天麻壯骨丸的薄層色譜研究》)